Refine
Year of publication
Document Type
- Doctoral Thesis (164) (remove)
Language
- German (164) (remove)
Keywords
- Geschmack (6)
- taste (6)
- Selen (5)
- Energiestoffwechsel (4)
- Metabolisches Syndrom (4)
- selenium (4)
- Bittergeschmack (3)
- Entzündung (3)
- Vitamin E (3)
- bitter taste (3)
- energy metabolism (3)
- glutathione peroxidase (3)
- 1-Hydroxymethylpyren (2)
- Adipositas (2)
- Biomarker (2)
- Ethanol (2)
- GI-GPx (2)
- Genregulation (2)
- Glutathionperoxidase (2)
- HEK293 (2)
- Insulin (2)
- Isoflavone (2)
- Körperzusammensetzung (2)
- Maus (2)
- Mercaptursäure (2)
- Nrf2 (2)
- Polymorphismus (2)
- Polyphenole (2)
- Prostaglandin E2 (2)
- Redoxregulation (2)
- Sulforaphan (2)
- Sulfotransferase (2)
- TAS2R (2)
- Tight Junction (2)
- Verhalten (2)
- alkylierte polyzyklische aromatische Kohlenwasserstoffe (2)
- benzylic alcohol (2)
- benzylischer Alkohol (2)
- biomarker (2)
- bitter (2)
- bitter taste receptors (2)
- colon carcinogenesis (2)
- colorectal cancer (2)
- ethanol (2)
- inflammation (2)
- mercapturic acid (2)
- metabolic syndrom (2)
- metabolic syndrome (2)
- mouse (2)
- obesity (2)
- polymorphism (2)
- redox regulation (2)
- sulfotransferase (2)
- tight junction (2)
- 1-hydroxy methyl pyrene (1)
- 1-hydroxymethylpyrene (1)
- 6-Shogaol (1)
- 6-shogaol (1)
- APC (1)
- Adioponectin (1)
- Agonisteninteraktion (1)
- Aldehyddehydrogenase (1)
- Alkohol (1)
- Alkoholdehydrogenase (1)
- Alltagsbedingungen (1)
- Alternativmethoden (1)
- Anaphylaxie (1)
- Atemwegserkrankungen (1)
- BPA (1)
- BRAF (1)
- Ballaststoffe (1)
- Barriere (1)
- Beta-Oxidation (1)
- Beta-Oxydation (1)
- Bifidobacterium (1)
- Bile Acids (1)
- Biotransformation (1)
- Bioverfügbarkeit (1)
- Bisphenol A (1)
- Bitter (1)
- Bittergeschmacksrezeptoren (1)
- Bitterrezeptoren (1)
- CAR (1)
- CEHC (1)
- CRC (1)
- CXCL10 (1)
- CYP3A4 (1)
- Caco-2 (1)
- Cannabidiol (CBD) (1)
- Carobballaststoff (1)
- Claudin-4 (1)
- Colitis ulcerosa (1)
- Colonkanzerogenese (1)
- Corticotropin-Releasing Factor Receptor Type 1 (1)
- Corticotropin-Releasing Factor Rezeptor Typ 1 (1)
- Coxsackie and Adenovirus Receptor (1)
- Coxsackie- und Adenovirus Rezeptor (1)
- Curcumin (1)
- Cyp3a11 (1)
- CypP450 (1)
- DASH study (1)
- DASH-Studie (1)
- DNA adducts (1)
- DNA-Addukte (1)
- Darmbakterium (1)
- Darmerkrankung (1)
- Darmkrebs (1)
- Darmkrebsdiagnostik (1)
- Desensibilisierung (1)
- Dickdarmkanzerogenese (1)
- Dickdarmkrebs (1)
- Dietary Fibre (1)
- Differenzierung (1)
- EST (1)
- Ellagsäure (1)
- Emulsion (1)
- Endocannabinoide (1)
- Endothelfunktion (1)
- Endothelzelle (1)
- Enzyme (1)
- Epigallocatechingallat (1)
- Epigenetik (1)
- Epstein-Barr Virus-induziertes Gen 3 (1)
- Equol (1)
- Erdnussallergie (1)
- Ernährung (1)
- Ernährungsfaktoren (1)
- Extrudate (1)
- FVB/NJ Maus (1)
- FVB/NJ mouse (1)
- Fettstoffwechsel (1)
- Fettsucht (1)
- Fettsäuren (1)
- Fettwahrnehmung (1)
- Flavonoid (1)
- Formyl-Peptid Rezeptor 2 (1)
- Frataxin (1)
- Fremdstoffmetabolismus (1)
- G protein-coupled receptors (1)
- G-Protein gekoppelte Rezeptoren (1)
- G-Protein-gekoppelte Rezeptoren (1)
- G-protein coupled receptors (1)
- GLUT8 (1)
- GPCR (1)
- GPX (1)
- GPx2 (1)
- Gallensäuren (1)
- Gallensäurenbindung (1)
- Gerontologie (1)
- Geschlecht (1)
- Geschmacksrezeptor (1)
- Getränkeauswahl (1)
- Getränkeautomat (1)
- Gewichtserhalt (1)
- Gewichtsreduktion (1)
- Glucosehomöostase (1)
- Glucosetransport (1)
- Grüner Tee (1)
- Hafer (1)
- Hautmodell (1)
- Heritabilität (1)
- Histologie (1)
- Hoch-Protein Diät (1)
- Hochfettdiät (1)
- Homocystein (1)
- Homologiemodellierung (1)
- Hormone (1)
- Hormonersatztherapie (1)
- Hydroxymethylfurfural (1)
- Hydroxymethylpyren (1)
- Hypertension (1)
- Hypertonie (1)
- IRAK (1)
- Immediate-early-Gen (1)
- Inflammation (1)
- Insulinresistenz (1)
- Interleukin-1 (1)
- Intimahyperplasie (1)
- Intimal Hyperplasia (1)
- K-ras (1)
- Kaede (1)
- Kalorienrestriktion (1)
- Kanzerogenese (1)
- Kardiovaskuläre Krankheit (1)
- Kernrezeptor (1)
- Kinetik (1)
- Knock-out (1)
- Kokultur (1)
- Kolonkrebs (1)
- Konsum (1)
- Kontaktallergie (1)
- Kontrollierte klinische Studie (1)
- Krebs (1)
- Kupfferzellen (1)
- Körperfett (1)
- Körpergewicht (1)
- Körpergewichtsregulation (1)
- Körpermasse (1)
- LC-MS/MS (1)
- LC/MS/MS (1)
- LNA- clamp-PCR (1)
- LNA-clamp-PCR (1)
- Langerhans Zellen (1)
- Lipasen (1)
- Lipidomics (1)
- Luteinester (1)
- Makrophagen (1)
- Mediterranean Diet (1)
- Medizinprodukt (1)
- Metabolismus (1)
- Microarray (1)
- Mitochondrien (1)
- Modelling (1)
- Muskelschwund (1)
- Myofibroblasten (1)
- Myrrhe (1)
- NAFLD (1)
- NF-kB (1)
- Nahrungsmittelallergie (1)
- Nahrunsgergänzungsmittel (1)
- Neointima (1)
- Neurone (1)
- Novelose (1)
- Nucleus tractus solitarii (1)
- Nukleosidaddukt (1)
- Oats (1)
- Oligomere (1)
- Olivenöl (1)
- Omega-3 Fettsäuren (1)
- Omega-Hydroxylation (1)
- Omega-Hydroxylierung (1)
- Optogenetik (1)
- Oxidativer Stress (1)
- PBPK (1)
- PBTK (1)
- PHGPx (1)
- PPARalpha (1)
- PXR (1)
- PhIP (1)
- Phase II Enzyme (1)
- Phenole (1)
- Pilot-Studie (1)
- Ponderostat (1)
- Prostaglandin (1)
- Proteine (1)
- Punktmutation (1)
- QSAR (1)
- Quercetin (1)
- Reactive Oxygen Species (1)
- Reaktive Sauerstoffspezies (1)
- Recycling (1)
- Redox (1)
- Reduktase (1)
- Reh (1)
- Rezeptoren (1)
- Rezeptorscreening (1)
- Rheologie (1)
- SCFA (1)
- SELENOH (1)
- SSCP (1)
- SULT1A1 (1)
- SULT1A2 (1)
- Salicin (1)
- Schwerkraft (1)
- Selenium (1)
- Selenoprotein (1)
- Selenoproteine (1)
- Sensorik (1)
- Set-Point (1)
- Signalübertragung (1)
- Sojabohne (1)
- Speichel (1)
- Spermienmotilität (1)
- Sport (1)
- Stammzelle (1)
- Stereotypien (1)
- Stickstoffmonoxid (1)
- Substratverwertung (1)
- Synbiotika (1)
- Säuglingsnahrung (1)
- Süßgeschmack (1)
- Süßrezeptor (1)
- Süßstoff (1)
- TTC (1)
- Tas1r1 (1)
- Tas2r (1)
- Tas2rs (1)
- Teecatechin (1)
- Thiolmodifikation (1)
- Tight Junctions (1)
- Toxikokinetik (1)
- Transforming Growth Factor beta (1)
- Transkriptionsfaktor (1)
- Tumor (1)
- Typ-2-Diabetes (1)
- Typ-2-Diabetes mellitus (1)
- Type-2-diabetes (1)
- VCAM-1 (1)
- Verhaltensstudien (1)
- Versuchstierkunde (1)
- Wiederkäuer (1)
- Wnt pathway (1)
- Wnt-Signalweg (1)
- Zelllinien (1)
- Zwillingsstudie (1)
- Zytokine (1)
- activity-regulated cytoskeleton-associated protein (1)
- ad libitum consumption (1)
- ad libitum-Verzehr (1)
- adiponectin (1)
- adiposity (1)
- agonists interaction (1)
- alcohol (1)
- alcohol dehydrogenase (1)
- alcylated polycyclic aromatic hydrocarbons (1)
- aldehyde dehydrogenase (1)
- alkylated polycyclic aromatic hydrocarbons (1)
- alpha-Catenin (1)
- alpha-tocopherol transfer protein (Ttpa) (1)
- anaphylaxis (1)
- antibacterial aerosol (1)
- antibakterielles Aerosol (1)
- aromatic amines; sulfotransferases; mutagenicity; bioactivation (1)
- aromatische Amine; Sulfotransferasen; Mutagenität; Bioaktivierung (1)
- asymmetric dimethylarginine (1)
- asymmetrisches Dimethylarginin (1)
- b-Catenin (1)
- barrier (1)
- behavior (1)
- behavioral experiments (1)
- behaviour (1)
- benzylic sulfate (1)
- benzylic sulfuric acid ester (1)
- benzylischer Schwefelsäureester (1)
- benzylisches Sulfat (1)
- beverage (1)
- bifidobacterium (1)
- bioavailability (1)
- biotransformation (1)
- body composition (1)
- body mass (1)
- body weight (1)
- calcium imaging (1)
- caloric restriction (1)
- cancer (1)
- cannabidiol (CBD) (1)
- carcinogenesis (1)
- cardiovascular risk (1)
- carob fibre (1)
- catFISH (1)
- cell line (1)
- central nervous system (1)
- claudin-4 (1)
- colon cancer (1)
- colon cancer diagnosis (1)
- colorectal carcinoma (1)
- curcumin (1)
- cytokines (1)
- desensitization (1)
- dietary supplements (1)
- differentiation (1)
- e-Zigarette (1)
- e-cigarette (1)
- electronic drug delivery system (EDDS) (1)
- electronic nicotin delivery system (ENDS) (1)
- ellagic acid (1)
- emulsion (1)
- endocannabinoids (1)
- endothelabhängige flussinduzierte Vasodilatation (1)
- endothelial cell (1)
- endothelial function (1)
- energy (1)
- enzymes (1)
- epigallocatechin gallate (1)
- equol (1)
- essential oils (1)
- exercise (1)
- expression analysis (1)
- extracellular matrix (1)
- extrazelluläre Matrix (1)
- fat metabolism (1)
- fat perception (1)
- fatty acids (1)
- flavonoid (1)
- food allergy (1)
- food choice (1)
- formyl peptide receptor 2 (1)
- frataxin (1)
- functional diversity (1)
- funktionelle Variabilität (1)
- gender (1)
- gene regulation (1)
- gerontology (1)
- glucose homeostasis (1)
- glucose transport (1)
- gravity (1)
- green tea (1)
- groEL (1)
- gut microbiota (1)
- hTAS2R10 (1)
- heritability (1)
- heterocyclic aromatic amine (1)
- heterocyclic aromatic amines (1)
- heterocyclisches aromatisches Amin (1)
- heterologe Expression (1)
- heterologous expression (1)
- heterozyklische aromatische Amine (1)
- high fat diet (1)
- high protein diet (1)
- homocysteine (1)
- homology modelling (1)
- hormones (1)
- human body composition (1)
- hydroxymethylfurfural (1)
- hydroxymethylpyrene (1)
- immediate early gene (1)
- in silico (1)
- inhalative Applikation (1)
- insulin (1)
- interleukin-1 (1)
- intesinal disease (1)
- intestinal epithelial cells (1)
- intestinal microbiota (1)
- intestinale Epithelzellen (1)
- intestinale Mikrobiota (1)
- isoflavones (1)
- kardiovaskuläres Risiko (1)
- ki-ras (1)
- kinetics (1)
- knock-out (1)
- kolorektales Karzinom (1)
- kurzkettige Fettsäuren (1)
- laboratory animal sciences (1)
- linear gemischte Modelle (1)
- linear mixed models (1)
- lipases (1)
- lipidomics (1)
- lutein esters (1)
- macrophages (1)
- malignant transformation (1)
- maligne Transformation (1)
- mediterrane Ernährung (1)
- metablism (1)
- metabolism (1)
- microarray (1)
- mitochondria (1)
- myofibroblast (1)
- myrrh (1)
- neuron (1)
- nitric oxide (1)
- nuclear receptor (1)
- nucleosidadduct (1)
- nucleus of the solitary tract (1)
- nukleärer Rezeptor (1)
- nutrients (1)
- nutrition (1)
- oligomers (1)
- omega-3 fatty acid (1)
- optogenetic (1)
- oral immunotherapy (1)
- orale Immuntherapie (1)
- peanut allergy (1)
- peripheral nervous system (1)
- peripheres Nervensystem (1)
- phase II enzymes (1)
- pilot study (1)
- point mutation (1)
- polyphenols (1)
- ponderostat (1)
- postmenopausal (1)
- proline rich proteins (1)
- prolinreiche Proteine (1)
- prostaglandin E2 (1)
- prostaglandine (1)
- protein (1)
- quantitativ (1)
- quantitative (1)
- quercetin (1)
- randomisierte Studie (1)
- randomized controlled trial (1)
- real life context (1)
- receptor (1)
- redox (1)
- reductase (1)
- respiratory diseases (1)
- roe deer (1)
- ruminant (1)
- saliva (1)
- sarcopenia (1)
- selenoprotein (1)
- selenoproteins (1)
- sensory analysis (1)
- set-point (1)
- signal transduction (1)
- situation (1)
- soy isoflavones (1)
- sperm motility (1)
- starter formula (1)
- stem cell (1)
- stereotypy (1)
- substrate utilisation (1)
- sulforaphan (1)
- sulforaphane (1)
- sweet taste (1)
- sweet taste receptor (1)
- sweetener (1)
- synbiotics (1)
- tannin binding salivary proteins (1)
- tanninbindende Speichelproteine (1)
- taste receptor (1)
- taste receptor screening (1)
- tea catechin (1)
- thiol modification (1)
- tight junctions (1)
- total body fat (1)
- toxicology (1)
- transcription factor (1)
- transforming growth factor beta (1)
- transgenes Mausmodell (1)
- transgenic mousemodel (1)
- tumor (1)
- twin study (1)
- type 2 diabetes mellitus (1)
- umami (1)
- vending machine (1)
- vesicular transport (1)
- vesikulärer Transport (1)
- vitamin E (1)
- weight maintenance (1)
- weight reduction (1)
- weight regulation (1)
- zentrales Nervensystem (1)
- Östrogene (1)
- ß-Glucan (1)
- ätherische Öle (1)
- α-Tocopheroltransferprotein (Ttpa) (1)
Institute
- Institut für Ernährungswissenschaft (164) (remove)
Die Zahl der Kolonkarzinome in den westlichen Industrieländern steigt in den letzten Jahren stetig an. Zu den Verbindungen, die mit der Zubereitung der Nahrung entstehen, mit ihr aufgenommen werden und die Kolonkanzerogenese möglicherweise begünstigen, gehört das heterozyklische aromatische PhIP, das bei der Erhitzung proteinreicher Nahrungsmittel entsteht. Neben zahlreichen Fütterungsversuchen an Nagern existieren auch Zellkulturmodelle zur Untersuchung der molekularen Mechanismen der PhIP-induzierten Kolonkanzerogenese. Die chemische Transformation von Zellen sollte durch wiederholte Exposition gegenüber dem hydroxylierten Metaboliten des Kanzerogens (N2-OH-PhIP) erzielt werden. Es wurden IEC-18-Zellen der Ratte und HCEC-Zellen des Menschen zur Untersuchung verwendet. Die Behandlung der IEC-18-Zellen führt nach 25 Behandlungszyklen mit Konzentrationen von 5 bis 20 µM nicht zur Transformation der Zellen. Die Anwesenheit von N2-OH-PhIP führt zu einer zehnfach erhöhten Induktion der GST-Aktivität, insbesondere der Untereinheiten GST-A1, -A3, -Pi und -T2, die für die effiziente Detoxifizierung des N-Acetoxy-Metaboliten vom N2-OH-PhIP verantwortlich sind. Bereits nach drei Behandlungen mit 1,5 µM N2-OH-PhIP konnte eine maligne Transformation der HCEC-Zellen erzielt werden. Die Zellen zeigten die charakteristischen Zeichen der Transformation: veränderte Wachstumseigenschaften wie klonales dreidimensionales Zellwachstum („pilling up“), Hemmung der Zell-Zell-Kontaktinhibierung, verkürzte Populationsverdopplungszeiten und tumorigene und metastasierende Eigenschaften. Außerdem exprimierten die N2-OH-PhIP-exponierten humanen Kolonzellen mit steigender Anzahl der Behandlungen größere Mengen des trunkierten APC-Proteins. Die bekannten PhIP-spezifischen Mutationen im APC-Gen resultieren in der Expression eines trunkierten Proteinproduktes und werden als frühe Ereignisse in der Kolonkanzerogenese betrachtet. Die zusammenfassende Betrachtung aller Ergebnisse zeigt, dass die IEC-18-Zelllinie zur chemischen Transformation durch N2-OH-PhIP ungeeignet ist. Dagegen wurde erstmalig eine vollständige chemische Transformation von Humandickdarmepithelzellen in vitro durch Exposition der humanen Kolonepithelzelllinie HCEC gegenüber dem Kolonkarzinogen N2-OH-PhIP erzielt.
Am Beispiel der Wiederkäuer wurde unter Zuhilfenahme von biochemischen und molekularbiologischen Methoden die Adaptation von Pflanzenfressern (Herbivoren) an pflanzliche Sekundärmetabolite wie z.B. Tannine untersucht. Tannine können in nicht an ihren Verzehr adaptierten Spezies durch ihr Proteinbindungsvermögen die Nahrungsverwertung und damit Wachstum und Gesundheit des Pflanzenfressers beeinträchtigen (antinutritive Wirkung). Einige Wiederkäuerarten wie z.B. das Reh (Capreolus capreolus) haben in ihrem Nahrungsspektrum viele stark tanninhaltige Pflanzen, leiden aber nicht unter den erwähnten postdigestiven Konsequenzen. Eine Möglichkeit, die antinutritive Wirkung von Tanninen zu neutralisieren, besteht in der Produktion tanninbindender Speichelproteine. Der Speichel verschiedener Wiederkäuerarten wurde auf das Vorhandensein tanninbindender Proteine untersucht. Diese Arten wurden so ausgewählt, dass alle drei Ernährungstypen (Konzentratselektierer, Intermediärtyp, Gras- und Rauhfutterfresser) in den Vergleich eingeschlossen werden konnten. Als Referenzspezies wurde der Konzentratselektierer Reh herangezogen. Die Speichelproteine des Rehs und die der Intermediärtypen (Rentier, Rangifer tarandus; Damhirsch, Cervus dama; Moschusochse, Ovibos moschatus) banden ungefähr doppelt so effektiv an hydrolysierbare Tannine (Tanninsäure), wie die der untersuchten Gras- und Rauhfutterfresser (Rind, Bos taurus; und Mufflon, Ovis orientalis musimon). Diese Abstufung zeigte sich auch bei der Untersuchung der Bindung an kondensierte Tannine (Quebracho). Eine Ausnahme stellte Mufflonspeichel dar, dieser band ebenso gut an Quebracho wie die Speichelproteine der anderen Ernährungstypen. Über eine Aminosäuretotalanalyse konnte festgestellt werden, dass der Speichel einiger untersuchter Wiederkäuerarten prolinreiche Proteine (PRPs) enthielt. Unter Ausnutzung ihrer Trichloressigsäure (TCA)-Löslichkeit wurden diese angereichert und genauer untersucht. Die Analyse der TCA-löslichen Speichelproteine der Konzentratselektierer (Reh, Elch) ergab einen relativen Prolingehalt von über 35 %, während beim Moschusochsen noch 29 % gemessen wurden. In Damhirsch- und Rinderspeichel wurden keine prolinreichen Proteine gefunden. Für die TCA-löslichen Speichelproteine des Rehs konnte eine hohe Tanninbindungskapazität nachgewiesen werden. Diese banden 24 - 30 x effektiver an Tannine als die TCA-löslichen Speichelproteine des Rindes. Die Tanninbindungskapazitäten der TCA-löslichen Speichelproteine von Moschusochse und Damhirsch waren ebenfalls höher als die des Rindes, aber niedriger als die des Rehs. Die Kohlenhydrat-Analyse der TCA-löslichen Speichelproteine des Rehs erbrachte, dass es sich bei ihnen um Glykoproteine handelt. Mittels Gelfiltration und zweidimensionaler Polyacrylamidgelektrophorese konnten fünf Proteingruppen mit Molekulargewichten zwischen 15 und 50 kd sowie isoelektrischen Punkten zwischen 4,0 und 8,2 detektiert werden. Von 15 dieser Proteine konnten die N-terminalen Aminosäuresequenzen ermittelt werden. Ausgehend von diesen Informationen wurden Reh-PRP spezifische mRNAs isoliert und partiell sequenziert. Die meisten dieser Fragmente hatten eine gemeinsame 18 Aminosäuren lange C-terminale Sequenz PPPEEQPEE/QSPDEE/DSPSE. Die Suche nach Übereinstimmungen der analysierten Sequenzen mit anderen Säugetier-PRPs in der Genbank ergab keine sinnvollen Ähnlichkeiten. Die Ergebnisse können zu Informationen über tanninbindende Proteine anderer Wiederkäuer führen. Die Sequenzinformationen stellen einen Ausgangspunkt bei der Analyse der evolutiven Zusammenhänge der Cerviden dar.
"Untersuchung kardioprotektiver Wirkungen des Olivenöles und seiner phenolischen Komponenten in einer Gruppe gesunder deutscher Männer" EINLEITUNG: Epidemiologische Daten belegen, dass die mediterrane Ernährung mit einer niedrigen Inzidenz an mit oxidativen Stress assoziierten kardiovaskulären Erkrankungen einhergeht. Dabei wird vor allem dem Olivenöl, als Hauptfettlieferant in der mediterranen Ernährung, eine kardioprotektive Wirkung zugesprochen. Olivenöl zeichnet sich neben dem hohen Gehalt an einfach ungesättigten Fettsäuren (MUFA) durch ein reichhaltiges Spektrum an phenolischen Verbindungen aus, deren antioxidative Wirkung bereits zahlreichen in in vitro Studien beschrieben wurde. Demnach könnte der Verzehr von phenolreichem Olivenöl auch in vivo vor oxidativen Schädigungen schützen und somit das Risiko für kardiovaskuläre Erkrankungen senken. ZIELSTELLUNG: Untersuchung der kardioprotektiven Wirkung von Olivenöl und seiner phenolischen Komponenten in einer Gruppe gesunder deutscher Männer. METHODE: Dazu wurde eine randomisierte cross-over doppelt-verblindete Interventionsstudie an 70 gesunden Männern zwischen 20 - 60 Jahren im Raum Berlin-Brandenburg durchgeführt. In jeweils drei dreiwöchigen Interventionsphasen konsumierten die Probanden täglich 25 ml natives (phenolreich), gemischtes (mittlerer Phenolgehalt) und raffiniertes (annähernd phenolfrei) Olivenöl, was sich ausschließlich im Gehalt an phenolischen Verbindungen unterschied. Das Olivenöl sollte dabei die gewöhnlich verzehrten Fette ersetzen. Die Interventionsphasen waren durch zweiwöchige Wash out-Phasen unterbrochen. Die Erhebung der Blutlipide, Biomarker der Lipidperoxidation und endogene Antioxidantien erfolgte zu Studienbeginn sowie zu Beginn und Ende jeder Verzehrsperiode.ERGEBNISSE: Bei den Blutlipiden sowie den Biomarkern der Lipidperoxidation und den endogenen Antioxidantien konnte keine signifikante Veränderung in Abhängigkeit vom Phenolgehalt der applizierten Olivenöle nachgewiesen werden. Einzig die Glutathion-Reduktase-Aktivität stieg mit zunehmendem Gehalt an phenolischen Verbindungen (pTrend = 0,041). Unabhängig von der Konzentration der Phenole im Olivenöl wurde bei den Probanden durch den Olivenölverzehr eine Senkung von Gesamtcholesterol (p = 0,007) und Triglyzeride (p = 0,013) im Serum erzielt. Diese Wirkung geht einher mit einem gestiegenen MUFA-Anteil in der Ernährung aufgrund des Olivenölkonsums (p < 0,001). SCHLUSSFOLGERUNG: Die Hypothese, dass die Phenole im Olivenöl aufgrund ihrer in in vitro und Tierstudien beschriebenen antioxidativen Wirkung dem Olivenöl neben dem einzigartigen Fettsäureprofil eine zusätzliche kardioprotektive Wirkung bescheren, konnte in der vorliegenden Studie nicht gezeigt werden. Dennoch konnte durch den Olivenölverzehr und der damit einhergehenden Erhöhung des MUFA-Anteils in der Ernährung eine vorteilhafte Beeinflussung der Blutlipide erzielt werden. Obgleich Olivenöl nicht das vorwiegend verzehrte Fett in Deutschland darstellt, zeigten die befragten Probanden eine hohe Akzeptanz. Folglich könnte die Integration von Olivenöl in die habituelle Ernährung einen Beitrag zur Senkung des kardiovaskulären Erkrankungsrisikos leisten.
Untersuchung des Recyclings Kaede-fusionierter Corticotropin-Releasing-Factor Rezeptoren Typ 1
(2009)
Aktivierte G-Protein-gekoppelte Rezeptoren (GPCR) werden schnell desensitisiert, internalisiert und anschließend entweder lysosomal degradiert oder zur Plasmamembran (PM) recycelt. Zur Resensitisierung der Zellen tragen neben recycelten auch neusynthetisierte Rezeptoren bei. Die Überlagerung beider Prozesse erschwert die Untersuchung des Rezeptorrecyclings. In dieser Arbeit sollte mit Hilfe des photokonvertierbaren Fluoreszenzproteins Kaede eine Technik entwickelt werden, mit der es möglich ist Recycling- von Neusyntheseprozessen zu trennen und das Recycling von GPCR mikroskopisch in Echtzeit zu beobachten. Als Modellproteine wurden der Vasopressin-1a-Rezeptor V1aR (recycelnder Rezeptor), der Vasopressin-2-Rezeptor V2R (degradierter Rezeptor) und der Corticotropin-Releasing Factor-Rezeptor Typ 1 (CRF1R) verwendet, wobei bei Letzterem untersucht werden sollte, ob er nach Stimulation zur PM zurücktransportiert wird. Da Kaede als fluoreszierendes Protein mit den GPCR fusioniert wird, wurde zunächst überprüft, ob es die Eigenschaften der Rezeptoren verändert und generell für Transportstudien geeignet ist. Eventuell könnte die bereits publizierte Tetramerisierung von Kaede seine Anwendung verhindern oder erschweren. Mittels Fluoreszenz-Korrelationsspektroskopie konnte gezeigt werden, dass Kaede nicht tetramerisiert, wenn es an ein Membranprotein fusioniert ist. Außerdem konnte in in vitro- und Zellkulturexperimenten belegt werden, dass die native und die photokonvertierte Form von Kaede gleichermaßen stabil sind. Darüber hinaus zeigten Kaede-fusionierte GPCR sowohl in Kolokalisationsstudien als auch in Agonistbindungs- und Rezeptoraktivierungsexperimenten die gleichen Eigenschaften wie CFP- bzw. die unfusionierte Rezeptoren. Lediglich die Expression der Kaede-fusionierten Rezeptoren war geringer. Parallel wurde anhand der bereits publizierten Kaede-Struktur versucht, die Tetramerisierung des Proteins durch den Austausch interagierender Aminosäuren zu unterbinden. Die eingeführten Mutationen bewirkten aber eine Fehlfaltung des Proteins und damit den Verlust der Fluoreszenz. Da zuvor gezeigt werden konnte, dass Kaede-fusionierte Membranproteine nicht tetramerisieren und nicht die Eigenschaften der fusionierten Proteine verändern, war monomerisiertes Kaede zur Untersuchung des Rezeptorrecyclings nicht notwendig. Im zweiten Teil der Arbeit wurde mit Hilfe von Kaede-Fusionsproteinen und mikroskopischer Testsysteme das noch unbekannte Recyclingverhalten des CRF1R untersucht. Hierfür wurden die Kaede-fusionierten Rezeptoren in eukaryotischen Zellen exprimiert und mit Agonisten internalisiert. Die internalisierten Rezeptoren wurden in Endosomen selektiv mit UV-Strahlung photokonvertiert. Anschließend wurde der Transport der photokonvertierten Form verfolgt. Sowohl beim CRF1R als auch beim V1aR wurden Signale in der PM detektiert, beim V2R hingegen nicht. Dies zeigt, dass es sich beim CRF1R um einen recycelnden Rezeptor handelt. Die als Kontrolle eingesetzten Rezeptoren verhielten sich in diesem Experiment wie erwartet: Der V1aR wurde zur PM zurücktransportiert, der V2R nicht. Diese Ergebnisse konnten mit Hilfe biochemischer und durchflusscytometrischer Experimente bestätigt werden. Die Internalisierung des CRF1R verläuft Clathrin-vermittelt in Anwesenheit von β-Arrestin. Je nach Stabilität der β Arrestin-Interaktion unterscheidet man zwei Klassen von Rezeptoren: Klasse A-Rezeptoren interagieren transient mit β Arrestin und können recyceln. Im Gegensatz dazu gehen Klasse B-Rezeptoren eine stabile Interaktion mit β Arrestin ein und werden nach Internalisierung degradiert. In mikroskopischen Untersuchungen konnte für die aktivierten CRF1R und V1aR eine Rekrutierung von β Arrestin zur PM und eine transiente Interaktion mit β Arrestin gezeigt werden (Klasse A-Rezeptoren). Für den V2R wurde dagegen eine stabile Interaktion mit β Arrestin beobachtet (Klasse B-Rezeptor). Diese Daten stützen die Ergebnisse des Kaede-basierten Recyclingversuchs und zeigen, dass der CRF1R ein recycelnder Rezeptor ist. Ferner wurde untersucht, ob der CRF1R zu den schnell oder langsam recycelnden Rezeptoren zählt. Schnell recycelnde Rezeptoren werden direkt aus frühen Endosomen, langsam recycelnde hingegen über das Trans-Golgi-Netzwerk (TGN) bzw. über Recycling-Endosomen zur PM transportiert. Als Marker für das TGN oder die Recycling-Endosomen wurde Rab11 verwendet. In Kolokalisationsstudien konnte gezeigt werden, dass der CRF1R den langsam recycelnden Rezeptoren zugeordnet werden kann. Zusammenfassend konnte in dieser Arbeit belegt werden, dass Kaede als Fusionspartner für Membranproteine genutzt werden kann um deren Transport in Echtzeit zu studieren. Damit wurde erstmals eine mikroskopische Methode etabliert, die es erlaubt recycelnde von neusynthetisierten Rezeptoren zu unterscheiden. Mit Hilfe dieser Methode war es möglich zu zeigen, dass der CRF1R ein recycelnder Rezeptor ist.