An Escherichia coli system for evolving improved light-controlled DNA-binding proteins
- Light-switchable proteins offer numerous opportunities as tools for manipulating biological systems with exceptional degrees of spatiotemporal control. Most designed light-switchable proteins currently in use have not been optimised using the randomisation and selection/screening approaches that are widely used in other areas of protein engineering. Here we report an approach for screening light-switchable DNA-binding proteins that relies on light-dependent repression of the transcription of a fluorescent reporter. We demonstrate that the method can be used to recover a known light-switchable DNA-binding protein from a random library.
| Verfasserangaben: | Mostafizur Mazumder, Katherine E. BrechunORCiD, Yongjoo B. Kim, Stefan A. Hoffmann, Yih Yang Chen, Carrie-Lynn Keiski, Katja Maren ArndtORCiDGND, David R. McMillen, G. Andrew Woolley |
|---|---|
| DOI: | https://doi.org/10.1093/protein/gzv033 |
| ISSN: | 1741-0126 |
| ISSN: | 1741-0134 |
| Pubmed ID: | https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/26245690 |
| Titel des übergeordneten Werks (Englisch): | Protein engineering design & selection |
| Verlag: | Oxford Univ. Press |
| Verlagsort: | Oxford |
| Publikationstyp: | Wissenschaftlicher Artikel |
| Sprache: | Englisch |
| Jahr der Erstveröffentlichung: | 2015 |
| Erscheinungsjahr: | 2015 |
| Datum der Freischaltung: | 27.03.2017 |
| Freies Schlagwort / Tag: | directed evolution; fluorescent reporter; optogenetics |
| Band: | 28 |
| Ausgabe: | 9 |
| Seitenanzahl: | 10 |
| Erste Seite: | 293 |
| Letzte Seite: | 302 |
| Fördernde Institution: | Natural Sciences and Engineering Research Council of Canada; Human Frontiers Science Program |
| Organisationseinheiten: | Mathematisch-Naturwissenschaftliche Fakultät / Institut für Biochemie und Biologie |
| Peer Review: | Referiert |
